Le dosage du glucose par le DNS est un dosage colorimétrique du glucose.

Principe

On utilise les propriétés réductrices du glucose. À chaud et en milieu alcalin, il y a réduction de l'acide 3, 5-dinitrosalycilique : DNS (acide 2-hydroxy-3, 5-dinitrobenzoïque) qui joue le rôle d'oxydant, le glucose étant le réducteur.

• Réaction de réduction de l'acide 3, 5-dinitrosalicylique en acide 3-amino-2-hydroxy-5-nitrobenzoïque (3-amino-5-nitrosalicylique)  :

• Le glucose, quant à lui, est oxydé en divers produits d'oxydation :

.

L'acide 3-amino-5-nitrosalicylique est un composé rouge. Cette réaction n'est pas stœchiométrique : il n'y a pas de bilan d'oxydo-réduction. L'intensité de la coloration rouge est proportionnelle à la concentration de l'ose si on opère dans des conditions physico-chimiques constantes. Les droites d'étalonnage ne passent pas forcément par l'origine.

Cette méthode n'est pas applicable au dosage d'un mélange complexe de glucides réducteurs.

Protocole

Matériel

• Spectrophotomètre et ses cuves
• Tubes à essai lavés et secs
• Pipette automatique
• Béchers
• Fioles jaugées

Solutions

• Solution de glucose à 0, 005 mol/L
• DNS
• Eau distillée
• Solution à doser

Étapes

Préparation de la gamme d'étalonnage

Dans une série de tubes :

• introduire 0 - 0, 2 - 0, 4 - 0, 6 - 0, 9 - 1, 2 mL de solution de glucose à 0, 005 mol/L ;
• ajuster chaque tube à 1, 5 mL avec de l'eau distillée ;
• ajouter 1 mL de réactif 3-5 DNS ;
• mélanger et boucher les tubes avec du coton cardé et du papier aluminium ;
• porter au bain marie à 100 °C pendant 5 min précisément ;
• refroidir et ajouter 7, 5 mL (QSP 10 mL) d'eau distillée dans chaque tube (on suppose que l'évaporation est la même pour chaque tube), homogénéiser et laisser reposer pendant 15 min.

Lire les absorbances à 540 nm contre le blanc (tube n^o 0).

Essais

Ils sont à traiter dans les mêmes conditions opératoires.
Réaliser le dosage avec des prises d'essais de 0, 5 mL diluées convenablement, additionnées d'1 mL d'eau distilée et d'1 mL de DNS.

Tableau colorimétrique (résultats expérimentaux)

N° de tube	0	1	2	3	4	5
Solution étalon de glucose à 0, 005 mol/L en mL	0	0, 2	0, 4	0, 6	0, 9	1, 2
Eau distillée en mL (avant chauffage)	1, 5	1, 3	1, 1	0, 9	0, 6	0, 3
DNS en mL	1, 0	1, 0	1, 0	1, 0	1, 0	1, 0
Eau distillée en mL (après chauffage)	7, 5	7, 5	7, 5	7, 5	7, 5	7, 5
Quantité de glucose en µmol	0	1, 0	2, 0	3, 0	4, 5	6, 0

Ce tableau représente ce qui doit être mis dans chaque tube et en quelle quantité.

Principaux mots-clés de cette page : glucose - tubes - dns - eau - acide - solutions - distillée - dosage - réduction - amino - essai - 005 - mol - colorimétrique - hydroxy - réducteur - réaction - nitrosalicylique - rouge - conditions -

---

Ce texte est issu de l'encyclopédie Wikipedia. Vous pouvez consulter sa version originale dans cette encyclopédie à l'adresse http://fr.wikipedia.org/wiki/Dosage_du_glucose_par_le_DNS.
Voir la liste des contributeurs.
La version présentée ici à été extraite depuis cette source le 30/11/2010.
Ce texte est disponible sous les termes de la licence de documentation libre GNU (GFDL).
La liste des définitions proposées en tête de page est une sélection parmi les résultats obtenus à l'aide de la commande "define:" de Google.
Cette page fait partie du projet Wikibis.

---